"Rotor - Genе 3000 "

2006

1

Austria

"Амплификация и детекция продуктов полимеразной цепной реакции в режиме реального времени по трём флуоресцентным каналам; качественный и количественный анализ ДНК/РНК; проведение мультиплексных ПЦР-исследований; анализ результатов амплификации и плавления. Проведение качественной ПЦР в реальном времени для выявления ДНК/РНК возбудителей инфекций. Проведение количественной ПЦР (определение концентрации нуклеиновых кислот, вирусной нагрузки и т.д.).Проведение ОТ-ПЦР (RT-PCR) для анализа РНК. Мультиплексная ПЦР с одновременным анализом до 3 флуоресцентных мишеней (в зависимости от набора реагентов и используемых красителей). Генотипирование и выявление мутаций. Анализ кривых амплификации и кривых плавления. Контроль качества выделения нуклеиновых кислот с использованием внутреннего контроля. Научно-исследовательские работы в области молекулярной биологии и генетики."

Две модификации на 36 пробирок (0,2 мл) на 72 пробирки (стрипованные по 4-и штуки по 0,1 мл). Диапазон рабочих температур 25-99 ºС. Точность поддержания температуры ± 0,5ºС. Равномерность распределения температуры (от образца к образцу) ± 0,01ºС. Точность поддержания температуры образца ± 0,5ºС. Точность регулирования температуры ± 0,1ºС. Источники возбуждения флуоресценции (высокоэнергетические светодиоды) 470 nm, 530 nm, 585 nm, 625nm. Детертирующие фильтры 510 nm, 555 nm, 610 nm ± 10 нм, 660 nm hp, 585 nm hp, ,660 hp ( hp - широкополосные). Чувствительность фотоумножителя от 5 нМ раствора флуоресцеина.

модель относится к предыдущим поколениям приборов, благодаря своей надежности, оптической схеме (до 4 каналов детекции) и безупречной температурной однородности ротора, она до сих пор активно применяется в самых разных лабораториях.

1. Подготовка и включение.Включите прибор: Нажмите кнопку питания на задней (или боковой) панели термоциклера.Запустите ПК: Включите компьютер и откройте программу Rotor-Gene 6000 (или более раннюю версию Rotor-Gene 5.0/4.6, поставляемую с прибором).Подготовьте камеру: Убедитесь, что внутри реакционной камеры нет пыли, а ротор (на 36 или 72 лунки) чист и надежно сидит на шпинделе.2. Загрузка образцов и балансировка (Критически важно)Соблюдайте симметрию: Пробирки должны устанавливаться в ротор строго симметрично. При нечетном количестве образцов используйте пустые пробирки того же производителя для баланса.Стартовая лунка: Образец под номером 1 в программе должен физически находиться в гнезде №1 ротора.Установите кольцо (Locking Ring): Наденьте на ротор металлическое фиксирующее кольцо.Затяните гайку: Закрутите центральный винт кольца по часовой стрелке до упора пальцами. Внимание: Не перетягивайте гайку силой, но и не оставляйте ее ослабленной.Закройте крышку: Опустите массивную крышку прибора до щелчка фиксатора.3. Создание эксперимента в ПОНовый запуск: В меню программы выберите File -> New или нажмите иконку New Run.Выбор ротора: В появившемся окне укажите формат установленного ротора (36-Well Rotor или 72-Well Rotor). Нажмите Next.Оператор и описание: Введите имя оператора и при необходимости комментарии к запуску. Нажмите Next.Температурный профиль (Hold / Cycling):Задайте этап предварительного прогрева (Hold) — активация фермента.Настройте циклы (Cycling): укажите температуру и время для денатрации, отжига и элонгации согласно инструкции к тест-системе.Настройка съема сигнала (Acquisition):На этапе отжига или элонгации нажмите кнопку Acquiring to...Перенесите нужные каналы (например, Fam, Joe, Rox) из левого окна в правое.Калибровка гейнов (Gain):Нажмите кнопку Auto-Gain.Выберите автоматическую регулировку для всех каналов перед началом запуска (Perform calibrating before 1st cycle). Нажмите Close, затем Next.4. Описание образцов и запускСохранение файла: Нажмите кнопку Start Run. Программа предложит выбрать папку и сохранить файл эксперимента (расширение .rgq или .rea).Таблица образцов (Sample Setup): Откроется окно, где необходимо прописать названия образцов напротив номеров лунок. Укажите тип пробы: Unknown (неизвестный), Standard (стандарт), Positive Control (К+), Negative Control (К-). Нажмите OK.5. Окончание работыЗвуковой сигнал: По завершении термоциклирования прибор подаст сигнал, и вращение ротора прекратится.Выгрузка: Откройте крышку, аккуратно открутите и снимите фиксирующее кольцо. Извлеките пробирки.Утилизация: Никогда не открывайте пробирки после ПЦР, чтобы исключить контаминацию лаборатории продуктами амплификации. Сразу утилизируйте их.Выключение: Закройте программу, выключите прибор тумблером. Оставьте крышку термоциклера слегка приоткрытой для естественного охлаждения.